聚丙烯酰胺凝膠電泳條帶是什么意思?
聚丙烯酰胺凝膠電泳條帶是什么意思?
聚丙烯酰胺凝膠電泳 可以用于分離蛋白質、核suan等帶電粒子,由于分子量不同而被分開。
由于電泳前放置混雜樣品的槽子 是長條形的,因此混合物中各樣品在電泳中的就以條形的樣子被分開 形成了階梯式的條帶
聚丙烯酰胺凝膠電泳測蛋白質分子量
聚丙烯酰胺凝膠電泳可分為連續的和不連續的兩類,前者指整個電泳系統中所用緩沖液,pH值和凝膠網孔都是相同的,后者是指在電泳系統中采用了兩種或兩種以上的緩沖液,pH值和孔徑,不連續電泳能使稀的樣品在電泳過程中濃縮成層,從而提高分辨能力。蛋白質在聚丙烯酰胺凝膠中電泳時,它的遷移率取決于它所帶凈電荷以及分子的大小和形狀等因素。
如果加入一種試劑使電荷因素消除,那電泳遷移率就取決于分子的大小,就可以用電泳技術測定蛋白質的分子量。1967年,Shapiro等發現陰離子去污劑十二烷基硫suan鈉(SDS)具有這種作用。當向蛋白質溶液中加入足夠量SDS和巰基乙醇,SDS可使蛋白質分子中的二liu鍵還原。
由于十二烷基硫suan根帶負電,使各種蛋白質—SDS復合物都帶上相同密度的負電荷,它的量大大超過了蛋白質分子原的電荷量,因而掩蓋了不同種蛋白質間原有的電荷差別,SDS與蛋白質結合后,還可引起構象改變,蛋白質—SDS復合物形成近似“雪茄煙”形的長橢圓棒,不同蛋白質的SDS復合物的短軸長度都不一樣,約為18A,這樣的蛋白質—SDS復合物,在凝膠中的遷移率,不再受蛋白質原的電荷和形狀的影響,而取決于分子量的大小,因而SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳可以用于測定蛋白質的分子量。